梅毒血清试验阴性就是没有感染梅毒，如果梅毒血清学试验是阳性，代表曾经感染过梅毒或者现在正在感染梅毒。所以，梅毒血清学试验是阴性的，通常指的是没有感染梅毒。但是有一种情况下有可能梅毒血清学试验是阴性，当发生高危性行为之后的40-90天之内，这就是所谓梅毒的窗口期，在窗口期之内去做梅毒血清学试验检查，有可能化验检查是阴性，但是体内已经感染了梅毒，只不过梅毒螺旋体的量比较低微，在窗口期是检测不出来。一般建议患者在有高危性行为之后3个月和6个月分别做两次检查，才能完全排除梅毒感染。
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