高分辨率超声检查是评估甲状腺结节的首选方法。对触诊怀疑，或是在X 线、计算机断层扫描(CT)、磁共振成像(MRI)或正电子发射断层成像(PET)检查中提示的“甲状腺结节”均应行颈部超声检查。颈部超声可证实“甲状腺结节是否真正存在,确定甲状腺结节的大小、数量、位置、质地(实性或囊性)、形状、边界、包膜、钙化、血供和与周围组织的关系等情况，同时评估颈部区域有无淋巴结和淋巴结的大小、形态和结构特点。
某些超声征象有助于甲状腺结节的良恶性鉴别。下述两种超声改变的甲状腺结节几乎全部为良性：
1、纯囊性结节;
2、由多个小囊泡占据50％ 以上结节体积：呈海绵状改变的结节，99. 7％为良性。
以下超声征象提示甲状腺癌的可能性大：
1、实性低回声结节;
2、结节内血供丰富(TSH 正常情况下);
3、结节形态和边缘不规则、晕圈缺如;
4、微小钙化、针尖样弥散分布或簇状分布的钙化;
5、结节纵横比1;
6、同时伴有颈部淋巴结超声影像异常：如淋巴结呈圆形、边界不规则或模糊、内部回声不均、内部出现钙化、皮髓质分界不清、淋巴门消失或囊性变等。满足以上超声征象3条以上建议考虑手术治疗。
超声引导下细针穿刺抽吸活检( FNAB)是术前评估甲状腺结节良恶性，决定是否需要手术敏感度和特异度最高的方法。建议凡直径1 cm 的甲状腺结节，均可考虑超声引导下细针穿刺抽吸活检术+穿刺细胞性检查。经超声引导下细针穿刺抽吸活检仍不能确定良恶性的甲状腺结节，可对穿刺标本进行甲状腺癌分子标记物检测，如美国AsuraGen公司的甲状腺癌分子检测液态芯片。
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