Cushing 氏病必须明确诊断，才能避免不必要的手术和不良的治疗效果。但是由于高皮质醇症可能来自不是垂体瘤的外源性疾病(最常见的肺部肿物)，而且垂体肿瘤一般较小，影像学分辨困难，给诊断造成困难。
高皮质醇的确诊：
24小时尿中皮质醇检测、日间血浆的皮质醇水平、夜间的唾液皮质醇水平用来检测皮质醇分泌的节律紊乱。或者睡前的地塞米松抑制试验。
用于区分ACTH依赖性或非ACTH依赖性Cushing 氏病
1、地塞米松抑制试验，要进行6天才能说明问题；
2、CRH刺激试验。
3、如果两种试验都是阴性，又没有影像学支持，但是又不能排除垂体瘤。这时还可以采用岩下窦采样试验。
值得注意的是：
影像学即使有肿瘤，也不一定是由它引起的高皮质醇血症。因为尸检及正常人都有一定比例的垂体瘤。
影像学最近有一种叫(SPGR)的技术，可以达到1mm的MRI分辨率。对垂体微腺瘤的传统分辨率(50％-75％)至少提高到80％。然而误诊仍然很高4％。
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